小麦叶片谷氨酰胺合成酶的分离纯化及鉴定

为了解谷氨酰胺合成酶（Glutaminesynthetase，GS）同工酶在小麦中的种类、活性及亚基组成状况，利用盐析、凝胶过滤、阴离子交换层析等技术对小麦苗期叶片中的GS同工酶进行了分离纯化及鉴定。通过测定GS活性跟踪GS的纯化过程，利用NativePAGE结合活性染色技术检测GS的纯化效果，利用SDSPAGE鉴定GS的亚基组成。结果表明，在小麦幼苗叶片中检测到3种GS同工酶GS1、GS2和GSx，其中Gsx含量少，但活性高。从小麦幼苗叶片中纯化得到2个GS同工酶即GS1和GS2。GS1由39kD的亚基组成，GS2由45kD的亚基组成，没有纯化得到GSx。