小麦叶绿体果糖 1, 6 二磷酸醛缩酶活性的测定方法及应用

高等植物中的果糖1,6二磷酸醛缩酶（FBA）在叶肉细胞的叶绿体中高效表达，可逆催化卡尔文循环中果糖1,6二磷酸（FBP）和景天庚酮糖1,7二磷酸（SuBP）的合成反应，在各种非生物胁迫的逆境条件下，FBA会表现出不同的响应。为了测定小麦叶绿体FBA(CpFBA)的活性，进一步研究小麦中CpFBA的功能，本研究比较了两种酶活性测定方法：一种方法是根据FBA催化FBP分解的过程中NADH转化为NAD+的量来确定FBA的活性；另一种是利用谢利万诺夫试剂（Sediwanoffreagent）与酮糖FBP作用生成鲜红色复合物，根据OD520的变化测定FBA的活性。在此基础上，测定了两个小麦材料在4℃低温处理过程中CpFBA活性的变化。结果表明，谢利万诺夫试剂法对于测定小麦叶绿体FBA活性较为可行。CpFBA酶活性受到温度的影响，随着处理时间的延长，在35d内两个材料的FBA酶活都呈现升高降低升高的交替变化，相比较而言，对低温不敏感的小麦矮变1号相对稳定，对低温敏感的返白系小麦出现先升高后又逐渐降低的趋势。