水传病原微生物PCR-纳米金显色快速检测方法

水传病原微生物是腹泻等肠胃疾病发病的主要原因，而发展快速、有效的检测方法对于控制和减少该类微生物的传播风险十分重要.因此，本文研究了PCR反应结合不修饰的纳米金颗粒（Goldnano-particles，AuNPs）显色检测方法的最佳盐浓度、探针含量、PCR反应条件等，并从纳米金制备、病原菌种类、检测特异性等方面进行考核，确定了最优检测条件为：10μLPCR扩增产物混合20pmol探针，95℃反应5min，55.5℃反应3min后，40℃杂交10min；此时，先后加入90μL实验用纳米金和一定浓度的PBS溶液，室温观察颜色变化.结果发现，纳米金溶液由红色变为紫色或近于无色为阳性结果，对应的吸光度值迁移出530nm，以此可达到快速检测病原微生物的目的.