电转化法将luxAB基因导入毒死蜱降解菌β菌株的研究

采用电转化法将带发光酶基因luxAB的质粒pTR102导入毒死蜱降解菌β菌株,研究了细胞生长状态、电压强度、电击时间和质粒浓度对转化效率的影响,并对转化子的生理特性进行研究.实验结果表明,以处于对数生长早期的菌液制备感受态细胞,在质粒浓度16.5μg·mL-1、电压2.5kV,电击时间3ms条件下的转化率最高,可达2.73×102个.μg-1(以每μg质粒DNA中所含转化子个数计).转化子lux-β分别在抗生素平板和LB平板中传代10次,仍具有发光活性和对卡那霉素(Km)的抗性,说明质粒pTR102在转化子中可以稳定遗传.转化子的生理特性变化不显著,对毒死蜱的降解能力较出发菌株提高了近1倍.