转番木瓜环斑病毒复制酶基因番木瓜的多重定性检测

为监测和管理转基因番木瓜华农1号的商品化生产、销售，建立了相应的转基因定性检测方法．选用木瓜蛋白酶作为番木瓜的内源对照基因，建立对转基因番木瓜PRSV-Rep基因、外源CaMV 35S启动子序列、NOS终止子序列和NPTⅡ基因的常规PCR检测体系．退火温度为40～60 ℃时，都分别扩增出了清晰的目的基因．单基因常规PCR检测转基因模板量的下限为5×10－7g．建立的三重PCR检测技术，检测了包括NPTⅡ、Rep和CaMV 35S；NPTⅡ、Rep和Nos；NPTⅡ、Rep和Papain等3个组合．建立了NPTⅡ、ReP、CaMV35S和Nos 4个基因的四重PCR检测技术．