AtCS82基因T-DNA插入突变体筛选和过表达转基因植株的获得

AtCS82是拟南芥中一个功能未知的基因，推测该基因可能与种子油脂合成代谢相关。为探明AtCS82基因的功能，采用半定量RT–PCR法对AtCS82基因在拟南芥不同组织(茎、叶、花、果荚)中的表达情况进行了分析，发现其在果荚中的表达量较高，而在茎、叶、花中的表达量明显偏低，推测AtCS82基因可能参与种子发育；使用三引物法对T–DNA插入突变体进行纯合子筛选，并通过RT–PCR检测纯合子植株中AtCS82基因的表达情况，试验结果证明获得了稳定遗传的AtCS82基因沉默纯合突变体；通过构建pCAMBIA1300–35S::CS82过表达载体，并转化拟南芥哥伦比亚野生型(Col)的方式，获得了AtCS82基因的过表达转基因植株。