拟南芥IAA7的原核表达及稳定性分析

以pGEX–KG为基本骨架，构建了拟南芥IAA7蛋白的原核表达载体，用IPTG诱导IAA7在3种大肠杆菌表达菌株Rosetta、BL21和Tuner中表达，利用GST SefiroseTM resin亲和树脂分离纯化GST–IAA7融合蛋白，并分析重组蛋白在体外保存时的稳定性。结果表明：GST–IAA7融合蛋白在Rosetta菌株中于25 ℃和0.4 mmol/L IPTG诱导下表达较好；蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟(PMSF)可显著延长GST–IAA7在体外保存的时间，最后利用凝血酶切除GST标签后获得了纯化的IAA7蛋白质