对虾白斑综合症病毒wsv477基因的克隆表达与时相分析

本研究将WSSV的功能基因wsv477基因克隆到原核表达载体PGEX-4T-2中并转化大肠杆菌BL21，37℃条件下诱导了WSV477蛋白的表达，并以纯化的融合蛋白作为抗原免疫小鼠获得了多克隆抗体。该基因开放阅读框共624个核苷酸，编码208个氨基酸，GST融合蛋白为49kDa，抗体滴度为1：10000。RT-PCR和Western blot 分析表明该基因在病毒感染4小时后开始转录，6小时后开始表达，是WSSV感染的早期基因。这是首次较为系统的研究该基因，将为疾病诊断和控制提供帮助。