柑橘叶片蛋白质高效提取与溃疡病PthA蛋白Western blot分析

利用三氯乙酸-丙酮法、Tris-HCl提取法、改良的PBS法对柑橘叶片进行蛋白质提取比较研究, 发现改良的PBS法提取蛋白质，不仅提取效率高, 质量好，浓度高，而且杂质干扰较少, 技术操作简单。通过研究确定了一套适用于柑橘叶片蛋白质的提取、定量、凝胶制备、电泳、转膜、封闭、抗体孵育以及显色的Western blot方法。 利用这一方法对转pthA-nls基因的糖橙、转pthA-nls基因的冰糖橙叶片蛋白质进行了研究，发现与抗柑橘溃疡病相关的蛋白PthA在48 kD成功表达。