猪传染性胃肠炎病毒S基因的SYBR Green I荧光定量RT？PCR检测

为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)SYBR Green I荧光定量RT？PCR检测方法，根据GenBank收录的TGEV？Miller毒株的S基因序列，设计合成1对特异性引物，用RT？PCR方法从疫苗株中扩增TGEV S基因的部分保守片段，并克隆到pGEM？T Easy载体上，得到重组质粒作为荧光定量RT？PCR检测的标准模板，进行SYBR GreenⅠ荧光定量RT？PCR扩增，并制作标准曲线，建立TGEV的荧光定量RT？PCR检测方法。结果表明：该方法检测灵敏度可达30拷贝/μL，与猪圆环病毒、猪乙型脑炎病毒、猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒和猪流感病毒和猪细小病毒不发生交叉反应，具有重复性好、特异性强、灵敏度高等优点，可用于临床TGEV感染的早期诊断以及分子流行病学调查。