适合猪圆环病毒2生长的PK15均质细胞株的构建

为筛选出PCV2培养滴度最高的PK15细胞克隆株，采用稀释法从PK15混合细胞中分离单细胞克隆株，获得的细胞克隆用于接毒试验，即用同步接种法将猪圆环病毒2(PCV2)病毒细胞混合液以1∶100的比例接种单克隆细胞，接毒后经PCR与定量PCR检测得出A10细胞克隆培养PCV2，获得的病毒含量最高。将A10细胞进行第2轮细胞克隆，之后用同步接种法和异步接种法将PCV2感染A10细胞，并检测A10细胞接毒后的PCV2 DNA 含量，2种接毒方法获得的最高PCV2基因组的拷贝数分别为3.0×109、6.2×109/mL，高于用PK15混合细胞培养PCV2所获得的最高PCV2基因组拷贝数(107/mL)。综合以上结果，构建的PK15均质细胞克隆株比PK15混合细胞更适合PCV2的培养。