林麝源化脓隐秘杆菌LAMP快速检测方法的建立

根据GenBank已公布的化脓隐秘杆菌溶血素((Pyolysin，PLO)基因设计6条引物，建立一种灵敏的环介导等温扩增方法(loop-mediated isothermal amplification，LAMP)用于化脓隐秘杆菌(Arcanobacterium pyogenes)的快速检测，并对检测方法的特异性和灵敏度进行验证。对化脓隐秘杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、非O1霍乱弧菌、单增李斯特氏菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、嗜水气单孢菌、副溶血性弧菌、蜡样芽孢杆菌等9株实验菌株进行的特异性试验表明，建立的LAMP方法仅对化脓隐秘杆菌的检测结果为阳性；该方法的检测灵敏度在DNA水平上可达112 fg。采用本研究建立的方法检测20份林麝临床病例样品，共鉴定出10株化脓隐秘杆菌，与API Coryne生化鉴定方法的符合率为100%。