重组大肠埃希菌外膜蛋白OmpT的载体构建和表达条件优化及多克隆抗体制备

通过分子克隆，获得了OmpT蛋白的表达菌株；利用切胶纯化，获得了OmpT蛋白。用OmpT蛋白免疫小鼠，制备多克隆抗体，采用ELISA法检测抗体滴度为1∶1 600，用Western Blotting法检测抗血清特异性较好。采用正交试验，获得OmpT菌株的适宜表达条件为诱导菌液OD600 nm为1.0，IPTG添加终浓度为0.3 mmol/L，诱导时间为8 h，诱导温度32 ℃；适宜培养条件为葡萄糖质量分数0%，转速230 r/min，装液量50 mL