培养条件对重组毕赤酵母高密度表达猪胰岛素前体的影响

研究了基因工程菌Pichiapastotis高密度、高表达的培养条件。在全合成摇瓶培养基的基础上,考察了诱导过程中甲醇浓度、温度、pH、(NH4)2SO4及磷酸盐浓度等因素对猪胰岛素前体(PIP)表达的影响。研究表明:甲醇的最佳诱导浓度为6g/L,过高或过低的甲醇浓度都不利于菌体生长和蛋白表达;在菌体生长和蛋白表达阶段,pH应分别控制在5.5和4.0;诱导阶段,培养温度下降到28°C,可以提高重组蛋白质的表达量。上述结果用于15L全自动发酵罐实验,PIP表达水平达到了1.69g/L,是摇瓶结果的17倍。