人α2a干扰素酵母工程菌高产培养条件的研究

研究了摇瓶培养条件对人α2a干扰素酵母工程菌生长及表达的影响,结果表明,当基础料中腺嘌呤含量为20μg/mL,在发酵进行至12h时再加入20μg/mL腺嘌呤时,IFN-α2a生物活性及比活分别达到7.3×106IU/mL及6.77×107IU/mg。发酵过程中后期补入适量萄萄糖,且维持低糖水平,有利表达。维持总碳源含量不变,使培养基中葡萄糖与蔗糖的比例为1∶0.1,结果IFN-α2a生物活性及比活分别比对照增加了一倍以上。在发酵进行至12h时,加入2g/L谷氨酸,IFN-α2a生物活性及比活分别比对照提高了1.76倍及1.94倍,而添加0.25～1.0g/L赖氨酸也能显著提高表达水平。培养基初始pH对产物表达有较大影响,初始pH为6.5时,对表达最有利。利用上述摇瓶培养优化条件,在2.6L生物反应器中进行补料分批培养,人α2a干扰素生物活性达到1.3×107IU/mL,为原工艺的3倍。