|
华东理工大学学报 2013
解藻酸弧菌株ATCC 17749中海藻酸裂解酶基因的克隆与鉴定Keywords: 解藻酸弧菌ATCC,17749,海藻酸裂解酶,大肠杆菌,异源表达,酶活测定 Abstract: 以解藻酸弧菌株(Vibrioalginolyticus)ATCC17749为研究对象,利用生物信息学寻找并预测得到5个可能的海藻酸裂解酶基因algV1、algV2、algV3、algV4和algV5。通过构建5个以pET28a(+)为载体的大肠杆菌表达质粒pET28aalgV1、pET28aalgV2、pET28aalgV3、pET28aalgV4和pET28aalgV5,实现了5个基因的异源表达,并经海藻酸裂解酶定量和定性的活性分析,确定5个基因的编码产物都具有海藻酸裂解酶活性,其中重组的algV1、algV2和algV3为胞外酶,algV4和algV5为胞内酶。
|