仿刺参(Apostichopus japonicus)和海地瓜(Acaudina leucoprocta)体壁多肽的响应面法酶解和N 末端测序

为充分开发利用海参资源, 优化海参体壁酶解工艺, 鉴定海参多肽, 本文以水解度为指标,设计了3 因素(时间、温度和加酶量)3 水平的响应面实验, 得到海参水解的最优条件是: 仿刺参(Apostichopus japonicus)体壁在加酶量1.97%、温度55.7℃、水解136.8min 的条件下, 水解度为83.39%;海地瓜(Acaudina leucoprocta)体壁在加酶量1.70%、温度55.4℃、水解115.6min 的条件下, 水解度为63.68%。之后通过使用超滤膜、反相高效液相色谱(RP-HPLC)、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)技术和蛋白测序仪等分析手段从水解产物中分离鉴定出4 种多肽。其中, 经N 端序列鉴定出仿刺参多肽S1、S2 氨基酸残基序列分别为Gly-Pro-Val-Gly-Ala-Ser-Gly-Pro-Gln-Gly-Pro-Gln-Gly-Pro-Gln- Gly-Leu-Ser-Ala-Leu 和Trp-Pro-Pro-Gly-Asn-Ser-Gly-Ile-Gln-Gly。海地瓜多肽A1和A2 氨基酸残基序列分别为Gly-Ala-Asn-Gly-Asn 和Trp-Leu-Pro-Gly-Asp-Thr-Gly-Pro-Gln-Gly-Val-Thr-Gly-Pro-Val-Gly-Pro-Ala-Gly。