锯缘青蟹(Scylla serrata)特异性过敏原的研究

采用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳方法, 对锯缘青蟹肌肉中可溶性蛋白质进行分离, 以过敏患者阳性血清和正常人阴性血清作对照, 通过Western blot 鉴定出分子量为14.3kDa 的蛋白为锯缘青蟹的特异性过敏原。然后用Sephadex G75 凝胶过滤层析和DEAE-52 离子交换层析纯化出该过敏原,再经MALDI-TOF/TOF-MS 检测, 利用Blastz 在线分析。结果表明, 锯缘青蟹特异性过敏原为血蓝蛋白亚基, 经Clustal W 分析该蛋白的多肽片段序列与可口美青蟹、邓杰内斯蟹、加州龙虾、艾氏真蟹的血蓝蛋白亚基序列有很高的同源性, 经Prosite 数据库检索后发现肽段1 和肽段2 有酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和蛋白激酶C 磷酸化位点, 是过敏原参与机体反应的重要活性位点。