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ISSN: 2333-9721
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螺旋藻(Spirulina)基因组外DNA的高效提取与纯化

Keywords: 钝顶螺旋藻,基因组外DNA,提取,纯化,CTAB-蛋白酶K

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Abstract:

通过研究建立了一种简便、高效提取螺旋藻基因组外DNA(exDNA)的方法—CTAB-蛋白酶K法。该法先以含200 μg/ml蛋白酶K的CTAB提取液裂解螺旋藻细胞,并用氯仿/异戊醇抽提得到总DNA粗提物,粗提物再经100 μg/ml蛋白酶K酶解及酚/氯仿/异戊醇抽提得到总DNA,再利用凝胶冻融离心法得到高纯度exDNA。利用上述方法,对6株钝顶螺旋藻品系Sp-1、Sp-2、Sp-3、Sp-4、Sp-5和Sp-6所作的研究结果表明,(1) 6株品系均含有exDNA,但数目与相对质量不尽相同;(2) Sp-1、Sp-2、Sp-5和Sp-6均只有一种exDNA,依次约为1.15kb、0.75kb、1.15kb和1.1kb;(3) Sp-3和Sp-4均有2条exDNA带,Sp-3的exDNA约为1.55kb和3.0kb,Sp-4的exDNA约为1.8kb和3.6kb;(4) 螺旋藻品种(系)间exDNA的异同性及其与生理生态等特性的关系,暗示着exDNA可能与螺旋藻的分类、进化和形态建成等重大生物学课题有关,并有可能担负着某些生物学功能。

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