不同饥饿时段对黑鲷(Acanthopagrus schlegeli)ghrelin 基因表达的影响

设计了黑鲷ghrelin 基因的特异性引物, 提取胃组织总RNA 并扩增出目的片段, 将PCR 产物克隆到pGEM-T Easy 载体, 经质粒PCR 扩增、酶切和测序鉴定重组质粒, 构建标准曲线等, 成功建立了ghrelin 基因荧光实时定量PCR 检测方法, 以准确分析ghrelin 基因在黑鲷摄食调节中的作用。运用建立的荧光实时定量PCR 方法检测了不同饥饿时段(2 天、7 天)黑鲷胃、肠、下丘脑组织中ghrelin mRNA 的表达变化。结果表明, 饥饿2 天(短期饥饿), 黑鲷胃、肠组织中ghrelin mRNA 表达显著上升(P0.05); 饥饿7 天(长期饥饿), 黑鲷胃、肠组织ghrelin mRNA 表达比饥饿2 天显著下降, 但仍显著高于对照组, 下丘脑ghrelin mRNA 表达逐渐升高(P<0.05); 在同一饥饿时间内不同组织ghrelin mRNA 表达存在显著差异(P<0.05)。黑鲷不同组织ghrelin 基因的表达随不同饥饿时段呈现出不同的变化趋势, 推测ghrelin 基因参与了黑鲷摄食调节的生物学过程。