兔抗对虾白斑症病毒(WSSV)独特型抗体的制备及其特性分析

以前期已制备的抗WSSV 囊膜蛋白单克隆抗体4G9(Ab1)杂交瘤细胞生产小鼠腹水, 腹水经辛酸-硫酸铵法、Protein G 亲和层析法纯化后, 用以制备兔抗血清, 所得血清经纯化得到粗提的兔抗WSSV 独特型抗体(Ab2)。采用竞争酶联免疫吸附实验、间接免疫荧光法、斑点免疫印迹和蛋白免疫印迹等实验方法分析了Ab2 特性, 结果表明：Ab2 能识别Ab1 并与WSSV 竞争Ab1 的抗原结合位点, 是具有模拟WSSV 特性的抗独特型抗体; Ab2 能与中国对虾血细胞结合, 并能部分阻断WSSV 与血细胞膜的结合; 其与中国对虾血细胞膜上结合的蛋白分子量分别为94.5、51.5 和27.0kDa,由此推断, 这三个蛋白为WSSV 在中国对虾血细胞膜上的结合蛋白。本研究结果可为进一步研究WSSV 侵染机理提供资料。