刺参(Apostichopus japonicus)高温胁迫消减 cDNA文库的构建与分析

采用抑制性消减杂交技术(SSH)研究刺参高温胁迫下差异表达的基因。分别以高温实验组为检测组(tester)、常温对照组为驱动组(driver), 进行正向抑制性消减杂交; 以常温组为 tester、高温组为 driver, 进行反向消减杂交, 成功构建了刺参正反双向差异消减文库。从两个文库随机挑选 384个白斑克隆进行斑点杂交进一步筛选, 对其中差异显著的 50 个克隆进行测序分析。测序结果经BLAST 比对分析得出: 44 个克隆与已知基因序列高度同源, 主要包括 3 个上调表达基因和 2 个下调表达基因; 另外 5 个克隆为未知新基因序列。该消减文库的成功构建对刺参耐高温相关基因的深入研究以及阐述耐高温的分子机理有非常重要的意义。