三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)CYP2基因的cDNA克隆及表达分析

通过RT-PCR及SmartTM Race技术, 首次克隆了三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)CYP2基因cDNA全长序列。该基因cDNA全长1662bp, 编码一个由492个氨基酸组成的多肽, 预测理论等电点为6.348, 分子量大小为56.68kD。氨基酸序列中含有CYP基因家族所特有的K螺旋保守序列(ExxR)和血红素结合区(FxxGxxxCxG)。经氨基酸序列比对及系统进化树分析发现, 与岸蟹(Carcinus maenas)的同源性最高, 达到75%。实时荧光定量PCR结果表明, CYP2基因在肝胰腺、鳃、肌肉、血淋巴、心脏和眼柄中均有分布, 在肝胰腺中表达量最高。肌肉注射磺胺嘧啶后, 三疣梭子蟹高、中、低三剂量组CYP2基因表达较对照组都有上调, 并具有时间差异性, 低剂量组表达量逐渐降低, 趋于对照组, 中剂量组和高剂量组表达量先升高后降低, 6h后同一时间点, 均是高剂量组表达最高, 低剂量组最低。表明磺胺嘧啶可诱导三疣梭子蟹CYP2基因, CYP2基因可能参与三疣梭子蟹的药物代谢反应。