基于海洋细菌为受试生物的海洋防污剂快速筛选方法

本文研究探索了一种快速简单易行的海洋防污剂室内评价筛选方法。将待测防污剂均匀分散于凝胶溶液中, 然后均匀涂布到一定面积的玻璃板上, 固化得到含防污剂凝胶测试板, 将其置于接种有三种分离自舟山以东海域的优势海洋菌种 (编号为Y-16, W-1 和F-6)的人工加富海水中, 连续培养24h 后显微镜下可发现凝胶板表面上细菌菌落, 将凝胶板表面细菌淋洗、定容, 测定其光密度(optical density, OD)值, 计算平均抑菌率, 得到吡啶硫酮锌(ZPT)为38.87%, 吡啶硫酮铜(CPT)为41.24%, 三甲基氧化锡(TBTO)为65.19%, N,N-二甲基-3,4-二氯苄胺(DCDMA)为30.88%, 敌草隆(Diuron)仅为15.29%, 抑菌性大小为TBTO>CPT>ZPT>DCDMA>Diuron。实验结果表明5 种受试防污剂的抑菌性大小为TBTO>CPT>ZPT>DCDMA>Diuron。采用绘制OD-t 生长曲线法, 分别得到5种防污剂对3 种海洋细菌的最小抑制浓度(minimum inhibitory concentration, MIC), TBTO 对三种菌的MIC 均为0.5×10-3 mg/mL; CPT 对W-1 和F-6 的MIC 为0.97×10-3 mg/mL, 对Y-16 的MIC 为1.93 mg/mL; ZPT 对W-1 和Y-16 的MIC 为1.91×10-3 mg/mL, 对F-6 的MIC 为0.96×10-3 mg/mL;DCDMA 对W-1 和F-6 的MIC 为8.46×10-3 mg/mL, 对Y-16 的MIC 为42.29×10-3 mg/mL。其中, Diuron 对细菌的生长几乎没有抑制作用。其抑菌性与室内短期挂板结果具有一致性, 表明经OD-t 生长曲线得到的MIC 可作为溶剂可溶型防污剂评价的辅助方法。另外, 将本文中室内短期挂板方法应用于不同粒径的氧化亚铜的防污评价, 也取得了与文献一致的结果。