三疣梭子蟹CYP4C基因的cDNA克隆及表达分析

采用RT-PCR及Smart-TM Race技术，首次获得三疣梭子蟹CYP4C基因cDNA全长序列。该基因全长1888bp，编码一个由514个氨基酸组成的多肽，预测分子量大小为59.54kDa，理论等电点为8.08。氨基酸序列中含有CYP基因家族特有的K螺旋保守序列（ExxR）和血红素结合区（FxxGxxxCxG）。同源性及系统进化分析表明，三疣梭子蟹CYP4C基因与岸蟹、凡纳滨对虾、日本沼虾、中国对虾、沟虾、红螯螯虾的同源性分别为88%、72%、66%、59%、60%、59%。荧光定量RT-PCR结果表明，CYP4C在肝胰腺、肌肉、眼柄、鳃和心脏中均有分布，在肝胰腺中表达量最高。高盐（45）胁迫后，三疣梭子蟹CYP4C的表达量显著高于对照组，随着胁迫时间的延长出现逐渐降低的趋势，在胁迫48h后表达量达到对照组水平；低盐（11）胁迫条件下，CYP4C的表达水平随着胁迫时间的延长呈现逐渐下降的趋势，且从胁迫6h开始显著低于对照组。研究推测，CYP4C基因参与三疣梭子蟹盐度适应调节，是蜕皮机制的调控因子之一。