青蛤(Cyclina sinensis)IκB基因的克隆及其在鳗弧菌(Vibrio anguillarum)刺激下的表达分析

利用青蛤(Cyclina sinensis)转录组文库信息, 设计引物并克隆得到了青蛤TLRs信号通路中的关键信号分子IκB(CsIκB)基因的cDNA序列。该基因的开放阅读框为1134bp, 编码377个氨基酸, 分子量为41.79kDa, 其结构具备IκB家族基因的典型特征, 包括C端的6个锚蛋白重复序列(ankyrin repeat, ANK), N端的DS64GILS68降解序列以及C端的酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点(S373DDES377)。经BLASTX比对及分子系统学分析证明其是IκB家族的一员。进一步利用实时荧光定量PCR技术检测了CsIκB基因在青蛤不同组织及其在鳗弧菌(Vibrio anguillarum)胁迫下在特定组织中的时序性表达情况。结果表明, 该基因在样品的血淋巴、肝脏、外套膜、闭壳肌、鳃和性腺6种组织中普遍表达, 其中以血淋巴中表达水平最高。在鳗弧菌刺激后3h CsIκB在青蛤血淋巴中表达量明显上调, 并于6h达到最大值, 说明该基因参与了青蛤非特异免疫应答反应。