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海洋与湖沼 2015
短蛸(Octopus ocellatus)酪氨酸蛋白激酶基因的克隆及其mRNA 在细菌刺激后的表达规律Keywords: 短蛸,酪氨酸蛋白激酶,实时荧光定量PCR,藤黄微球菌,鳗弧菌 Abstract: 从前期构建的短蛸(Octopus ocellatus)cDNA 文库中克隆获得了一个短蛸酪氨酸蛋白激酶(OoBtk)基因的cDNA 全长, 其cDNA 全长1191 bp, 包括5'非编码区(UTR)259 bp, 3'UTR 227 bp, 开放阅读框(ORF)705 bp, 编码234 个氨基酸, 预测理论等电点为8.50, 分子量为27.7 kDa。运用实时荧光定量PCR法分析了在健康短蛸的不同组织以及鳗弧菌和藤黄微球菌刺激后血细胞中OoBtk 的表达规律, 结果表明: OoBtk 在肌肉、外套膜、鳃、鳃心、系统心脏、肝胰脏、肾囊、胃、性腺和血细胞等各检测组织中均有表达, 其中在肝胰脏的表达量最高; 短蛸经鳗弧菌和藤黄微球菌刺激后,OoBtk 在血细胞中的表达量呈现出了明显的被诱导表达趋势, 在鳗弧菌和藤黄微球菌刺激后6 h 表达即增强, 并分别在鳗弧菌刺激后48 h 和藤黄微球菌刺激后12 h 达到最高。OoBtk 参与短蛸对于鳗弧菌和藤黄微球菌刺激的应答过程。
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