Catalase-TAT的融合表达与表征

利用RT-PCR技术从人的肝细胞中克隆出成熟蛋白过氧化氢酶(catalase)的基因， 通过PCR将其与TAT基因融合形成融合基因（catalase-TAT）； 将catalase-TAT基因构建到表达质粒pET21a(+)中， 转入大肠杆菌Rosetta2 (DE3)； 通过IPTG诱导， 转化子成功表达出catalase-TAT融合蛋白. 重组菌发酵菌体破碎液经过硫酸铵沉降和Sp-5pw阳离子交换色谱， 分离得到电泳纯的目的蛋白， 其纯化倍数为18.51倍； 经理化性质分析确定了此融合蛋白的最适pH和温度稳定性； 细胞实验表明融合蛋白catalase-TAT能够明显提高胞内的过氧化氢酶活性.