枯草芽孢杆菌启动子的克隆及功能验证

以pHT01穿梭质粒为骨架，构建以卡那霉素抗性基因为报告基因的启动子探针载体pHT-kan. 利用该探针载体在大肠杆菌中克隆枯草芽孢杆菌168的启动子活性片段，挑取得到100个重组子. 通过卡那霉素浓度梯度筛选出2个抗性最强的片段进行序列测定和分析，将启动子片段命名为BSP25、BSP31. 将抗性最高的两个载体转入枯草芽孢杆菌168菌株，结果表明，它们可以在枯草芽孢杆菌中启动卡那霉素抗性基因的表达，重组菌株表现出卡那霉素抗性.