天然抗冻多肽的制备、 分离及细菌低温保护活性研究

利用热水抽提法提取鲨鱼皮明胶，控制酶法水解条件制备天然抗冻多肽. 以细菌低温保护活性为指标，筛选蛋白水解酶种类及酶解时间，利用Sephadex G-50凝胶过滤色谱、SP-Sephadex C-25强阳离子交换色谱等分离手段进行分离，得到细菌低温保护高活性组分. 结果表明，酶解鲨鱼皮明胶得到高活性抗冻多肽的最适蛋白水解酶为酸性蛋白酶，酶解温度50 ℃、 pH3.0、酶/底物3 000 U·g -1、底物浓度3%、酶解时间1 h；经过Sephadex G-50凝胶过滤色谱、 SP-Sephadex C-25强阳离子交换色谱等分离手段得到阳离子的P2组分，经过细菌低温保护测试，当浓度为500 μg·mL-1时，大肠杆菌的存活率达到80.8%. 分离得到的抗冻多肽具有较高的抗冻活性，可望应用于食品、 医药等产业中.