邻苯二甲酸酐化学修饰对辣根过氧化物酶催化活性的影响

通过采用邻苯二甲酸酐（ＰＡ）对辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）的蛋白链进行修饰，研究了ＰＡ化学修饰对ＨＲＰ的稳定性、催化活性、活性中心结构、酶对底物的亲合性和专一性等催化性质的影响．结果显示：酸性条件下（ｐＨ＝３），４小时后ＰＡ ＨＲＰ的催化活性比天然ＨＲＰ提高了７．５％；碱性条件下（ｐＨ＝１０），４小时后ＰＡ ＨＲＰ的催化活性比天然ＨＲＰ提高了２７％．ＰＡ ＨＲＰ的Ｋｍ值为８．１６（ｍｍｏｌ／Ｌ），小于天然ＨＲＰ的Ｋｍ值１２．９９（ｍｍｏｌ／Ｌ），而ＰＡ ＨＲＰ的ｋｃａｔ／Ｋｍ值为７．８６（１０４（Ｌ／ｍｍｏｌ？ ｍｉｎ）大于天然ＨＲＰ的ｋｃａｔ／Ｋｍ的６．７０（１０４（Ｌ／ｍｍｏｌ？ ｍｉｎ）．这些催化活性和动力学数据表明了ＰＡ ＨＲＰ与天然ＨＲＰ相比其稳定性、酶对底物的亲和性和专一性得到了提高．紫外－可见光谱、拉曼光谱数据显示：修饰剂ＰＡ改变了天然ＨＲＰ血红素周围的微环境，对酶蛋白分子的活性中心结构并没有影响．差示光谱显示ＰＡ修饰剂可以提高酶对底物的亲和力．