棉花纤维素合酶基因GhcelA1克隆及其载体构建

根据GeneBank中GhcelA1（U58283）序列，利用RT-PCR技术，从棉纤维中克隆到GhcelA1cDNA全长。运用基因重组技术，构建pCAM2300-35S-GhcelA1过表达载体；融合基因表达载体pCAM2300-35S-GhcelA1-EGFP，以及pCAM2300-35S-GhcelA1-RNAi载体，这些载体均通过限制性酶切鉴定和测序验证。农杆菌介导法将融合基因转化棉花子叶，通过激光共聚焦荧光显微镜，在蓝色激发光下观察诱导的愈伤，发现在转化的活体细胞核与质膜内侧有绿色荧光，说明融合基因载体EGFP构建正确，可以在棉花中正常表达。所构建的系列载体可用于转化棉花，促进纤维素在棉纤维中合成与积累。