棉花纤维特异表达GhCesA4启动子的克隆及序列分析

以新疆陆地棉品种新陆早19的DNA为模板，克隆了棉花纤维特异启动子GhCesA4，GenBank登录号EU183119，将启动子基因序列克隆到pMD19-T载体中，由载体通用引物M13-47、RV-M经PCR鉴定获得pMD19-T/GhCesA4重组载体。测序和序列分析表明，该启动子序列由1503bp核苷酸组成，与GenBank中GhCesA4基因启动子序列同源性高达98％。分别用限制性内切酶ClaⅠ和BamⅠ双酶切重组质pMD19-T/GhCesA4和双元植物表达载体pBI121，分别回收pMD19-T/GhCesA4重组质粒中的GhCesA4小片段和pBI121植物表达载体中缺失CaMV35S组成型启动子的大片段，经连接、转化、酶切及测序鉴定，获得由GhCesA4驱动报告基因GUS的新型植物表达载体，命名为pBI-GhCesA4