两个棉花几丁质酶基因的克隆与表达分析

从棉花黄萎病缩减杂交库中得到了分属Ⅲ型和Ⅳ型几丁质酶的两个片段，它们都具有完整的3’末端。通过RACE与RT-PCR结合获得了这2个基因完整的读码框序列。其中Ⅳ型几丁质酶的开放读码框为678bp，编码长为226个氨基酸的蛋白，命名为Ghachi4；Ⅲ型几丁质酶的全长为1390bp，编码长为298个氨基酸的蛋白，命名为Ghachi3。它们与拟南芥同源基因的相似性分别达到65%和71%。利用网上分析软件发现这2个基因都有信号肽序列，并预测编码的蛋白位于胞质体外。半定量RTPCR发现Ghachi3在花、蕾和韧皮部中的表达量较高，而Ghachi4在韧皮部表达量最高。Ghachi4仅在抗病品种受黄萎病和枯萎病的诱导后表达上调，而Ghachi3还在感病品种中受黄萎病的诱导表达。同时，在常抗棉中2个基因的表达都受到ABA的强烈诱导。推测这2个基因可能参与生物胁迫或非生物胁迫的防御反应。