钙调素拮抗剂诱导人肺癌细胞PLA-801凋亡机理研究

用20μmolL-1的TFP处理人肺癌细胞PLA-801,强烈抑制了细胞的增殖.软琼脂实验发现加药组细胞集落形成率为对照组的63.6%,这表明部分细胞失去了在软琼脂中形成集落的能力.流式细胞光度术显示,加药组细胞G1期峰前出现了程序性细胞死亡的特征峰,荧光染料Heochst33342染色后,荧光显微镜下观察,可见到部分细胞凋亡时核凝集、边化、断裂的情形.提取细胞总DNA进行琼脂糖凝胶电泳,可见加药组细胞出现了凋亡细胞特有的DNA“梯子”.这些结果表明20μmolL-1TFP诱导了细胞的凋亡,这可能是细胞增殖受到抑制的原因之一.进一步测定20μmolL-1TFP处理细胞时细胞内CaM的活性和细胞内cAMP的水平,发现20μmolL-1TFP处理使细胞内钙调素的活性抑制了95.1%而cAMP水平迅速上升至2.8倍.在细胞内钙离子的主要受体—钙调素的活性被强烈抑制时,cAMP水平的迅速上升可能是PLA-801凋亡的主要原因.