通过mRNA差异显示分离一个新的斑马鱼胚胎发育基因

无脊椎动物果蝇形态发生分子机理被揭示之后,脊椎动物形态发生分子机理的研究成为发育生物学的研究焦点.作为脊椎动物研究模型的斑马鱼,其胚胎发育基因的分离无疑是进行该研究的入手点.分离斑马鱼胚胎发育基因有多种有效的方法可供选择.本文用mRNA差异显示技术对斑马鱼卵受精后4,5和6h(285℃)的胚胎(分别相当于oblong,dome和shield3个时期[1],分别称为囊胚、原肠胚和神经胚)的mRNA进行了差异显示,对其中一个神经胚特异的cDNA片段(pNs2)进行了克隆和序列分析,与Genbank中已有的基因序列比较后发现,该片段是一个新的基因片段.采用整体原位杂交(wholemountinsituhybridization)技术,对该基因在斑马鱼胚胎发育过程中的表达进行了研究,进一步确认该基因是神经胚特异表达的基因