枯草杆菌TrpRS与小螺旋DNA的紫外光定点交联

为研究枯草杆菌色氨酰-tRNA合成酶(TrpRS)与小螺旋DNA的相互识别及其结构与功能的关系,人工合成了4种小螺旋DNA(其中3种在不同位点带有光化学交联试剂s4T),纯化了枯草杆菌TrpRS.设计制作紫外交联仪,进行了TrpRS与小螺旋DNA的紫外光定点交联实验,优化了紫外交联条件.实验结果表明,小螺旋DNA分子中对应于tRNATrp73,72位的碱基与TrpRS有直接的相互作用,而对应于tRNATrp55位的碱基与TrpRS无直接的相互作用.紫外交联产物的量与紫外光照射剂量、TrpRS浓度、小螺旋DNA浓度呈正相关.