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科学通报 2001
硒代甲硫氨酸抗烟毒素蛋白衍生物的制备, PP. 662-666 Keywords: 硒代甲硫氨酸抗烟毒素蛋白衍生物,晶体,表达,纯化,质谱 Abstract: 为利用硒原子的反常散射获取抗烟毒素蛋白晶体X射线衍射的相位信息,以质粒pQE-30为表达载体,E.coliM15为宿主菌,在含有硒代甲硫氨酸的M9培养基中用IPTG诱导表达硒代甲硫氨酸抗烟毒素蛋白衍生物.通过Ni-NTA金属亲合层析和MonoQ阴离子交换层析纯化目标蛋白.产物经SDS-PAGE检验纯度达95%以上,经MALDI-TOF和ESI-Quadrupole质谱检测证实抗烟毒素蛋白硒代甲硫氨酸标记成功.采用与抗烟毒素蛋白晶体生长类似的条件,获得了衍生物可供衍射的晶体.
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