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科学通报 2001
环腺苷酸应答元件结合蛋白(CREB)参与人hsp90β基因的热诱导表达, PP. 1300-1303 Keywords: hsp90β基因,CRE,CREB,PKA,CAT Abstract: 为研究cAMP应答元件(CRE)在人热休克蛋白hsp90b基因表达中的作用β构建了数个受hsp90β基因不同长度调控片段介导的氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因质粒.分别转染Jurkat细胞并检测42℃1h热诱导前后CAT活性.结果发现删除hsp90β基因上游含CRE片段(-173/-91bp)后,CAT的热诱导表达活性降低了67%.电泳迁移率变更分析(EMSA)显示热休克后Jurkat细胞的核抽提物中磷酸化的CREB与该片段呈特异性结合.Western印迹实验及PKA活性检测发现CREB的磷酸化程度及PKA活性均随热诱导时间的延长而增加.以上结果表明磷酸化的CREB通过与hsp90β基因上游的CRE结合参与该基因的热诱导表达,并可能与PKA传导途径有关.
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