一种新的微管相关蛋白JWA对细胞内氨基酸平衡有重要调节作用

探讨了JWA蛋白在细胞内的确切定位、与微管蛋白的相互关系及对细胞内氨基酸平衡的调节作用.应用4~37℃(微管解聚-聚合)交替作用法提取纯化大鼠脑组织中微管及其相关蛋白;用免疫共沉淀法研究JWA蛋白与微管蛋白的相互作用;应用基因转染和免疫荧光等实验方法研究低温(4℃)、秋水仙素(1×10-5,5×10-5mol/L)等处理的HBE细胞/NIH3T3细胞中JWA和微管的动态变化及相互关系.应用反义寡核苷酸技术结合氨基酸分析技术探讨JWA蛋白对PC12细胞内氨基酸平衡的调节作用.结果表明,JWA蛋白是一种新的微管相关蛋白,与微管蛋白分布基本平行,在绝大多数情况下伴随微管动力学改变(聚合或解聚)而同步发生变化,并且可能参与了细胞有丝分裂的过程.JWA蛋白是细胞内氨基酸总量的一种重要负性调节蛋白,并选择性地调节细胞内谷氨酸和牛磺酸含量.