6个植物MARs序列的ARS功能鉴定与分析

利用酵母表达系统,对来自烟草和拟南芥的6个植物MARs序列分别进行了ARS功能鉴定.结果表明,在酵母细胞内,TM1和AM4有强的自主复制功能,其活性与来自酵母染色体的ARS相当,其他4个植物MARs序列无ARS活性.为了进一步分析植物MAR序列中ARS的活性区,利用PCR方法对TM1和AM4进行亚克隆,相应的亚克隆分别命名为TM1-1,TM1-2,TM1-3,AM4-1,AM4-2和AM4-3.实验发现,TM1-3和AM4-3不仅具有比完整MARs更高的ARS活性,而且在酵母转化效率、转化稳定性及生长速度方面也优于完整片段.本研究结果为阐明MAR的作用机制与自主复制功能的关系提供了重要线索.