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科学通报 2009
磁螺菌MSR-1磁小体缺失突变株NM21Tn5侧翼序列的克隆及功能分析, PP. 892-897 Keywords: M.,gryphiswaldense,磁小体缺失突变株,基因克隆,功能分析,Fe2+转运蛋白 Abstract: 利用mini-Tn5lacZ2对磁螺菌(Magnetospirillumgryphiswaldense)MSR-1进行转座插入突变,获得磁小体缺失突变株NM21.通过锚定PCR从NM21中克隆出Tn5插入位点的侧翼序列,获得长3073bp的DNA片段,其中含有3个ORF,Tn5插入在ORF1中,互补实验证明该片段与磁小体合成相关.对ORF1编码的蛋白进行同源比较和功能分析,发现ORF1编码的蛋白中部有4个跨膜螺旋,与其同源性较高的序列全部为二价阳离子转运蛋白.BLAST软件分析表明,ORF1编码的蛋白具有COG0053和PRK09509结构域,与FieF和MMT1等二价阳离子转运蛋白家族CDF(cationdiffusionfacilitator)有相同的结构域,推测其为磁小体膜上Fe2+的转运蛋白,且可能在去除Fe2+对细胞毒害的过程中起着重要作用.
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