猪leptin受体基因OBR的表达检测与部分片段克隆分析

采用RT-PCR和Northern杂交的方法分析了猪leptin受体OBR基因在11种组织和器官(心肌、肺、肝、脾、肾、肌肉、卵巢、脂肪、大脑、垂体、下丘脑)中的表达分布,结果表明OBR基因在11种组织和器官中都有表达,其中在肺、肝和下丘脑的表达高于其他组织.Northern杂交分析结果显示,编码长细胞内区的长片段表达形式只在下丘脑组织中表达,而已有证据表明只有编码长细胞内区的长片段表达形式才具有信号转导功能,因此推断猪的leptin调节体重的作用主要通过下丘脑发挥作用.利用RT-PCR技术克隆测定了猪的OBR基因编码胞内区部分的核苷酸序列(约2.5kb).猪与人和鼠的核酸序列同源性分别为89.3%和80.3%,氨基酸同源性分别为80.3%和76.6%.通过分析推测的氨基酸序列,找到了两个WSXWS(Tyr-Ser-X-Tyr-Ser)的基本序列.这两个序列是细胞因子超家族的共有结构,因此推断和人、鼠的情况一样,猪的leptin的信号转导也是通过JAK-STAT途径实现的.