杆状病毒P49蛋白的Caspase切割位点的鉴定

海灰翅夜蛾核型多角体病毒(SlNPV)的p49基因,可抑制病毒感染引起的昆虫细胞Sf9的凋亡.用杆状病毒Bac-to-Bac表达系统表达的P49蛋白可抑制Caspase的活性.通过氨基酸序列测定发现,P49蛋白的91~95位的氨基酸序列是91TVTDG95.P49蛋白在体外可被人及家蚕Caspase切割,切割后均产生约10和40kD的2个片段.经定点诱变得到的P49蛋白94位氨基酸突变体不能被人及家蚕Caspase切割,同时也失去对Caspase的抑制功能.而91位突变体蛋白仍可被Caspase切割,并保留了对Caspase抑制的部分活性.P49蛋白不仅作用于下游的效应Caspase,也可作用于上游的启始Caspase,它是一个广谱的Caspase抑制剂.