利用安全性转基因技术导入反义蜡质基因降低稻米直链淀粉含量

利用安全性转基因技术中的共转化法,将分别含有p13W4双元载体(含有潮霉素抗性基因、gus报告基因以及反义蜡质基因片段)和p13W8双元载体(无潮霉素抗性基因和gus报告基因,只含有反义蜡质基因片段)的根癌农杆菌以19的比例混合导入超2-10高产水稻新品系中,获得34棵转基因植株.PCR分析转基因T0代植株,结果显示,有15株是共转化植株,共转化率为44.1%.利用p13W4双元载体上的gus报告基因从T1代种子中淘汰具有报告基因及抗性标记基因的转基因后代,再利用PCR检测从T1代植株中获得只有反义蜡质基因的植株.Southernblot杂交分析证实,p13W8双元载体T-DNA已整合进入无抗性标记及报告基因的转基因后代基因组中.T2代成熟种子直链淀粉含量分析显示,转基因植株糙米直链淀粉含量比对照有不同程度的下降,幅度最大的比对照降低28.61%.由于获得的转基因后代只有目的基因而无抗性选择标记基因和报告基因,而且水稻中的稻米直链淀粉含量已降低,它们既可被用于筛选软米材料,也可视为是能够用于其他水稻稻米食味品质改良的水稻新资源.