棕色固氮菌nifE缺失突变株(DJ35)钼铁蛋白的特性

从棕色固氮菌缺失nifE的突变株DJ35中纯化得到纯度约为80%的MoFe蛋白(ΔnifEAv1).与野生种OP中纯化出的MoFe蛋白(OPAv1)相比,ΔnifEAv1具有与之相同的亚基组成,并可与OPAv1的抗体发生免疫交叉反应,但在厌氧天然电泳中的迁移率略大于OPAv1.金属含量测定表明,ΔnifEAv1的Mo和Fe含量均显著下降.ΔnifEAv1单独与OPFe蛋白互补时不具乙炔还原活性,但可被从OPAv1中抽提出的FeMo-co体外激活.ΔnifEAv1的圆二色谱450nm附近区域与OPAv1的相似,而电子顺磁共振谱中g≈3.7的信号则完全消失,g≈4.3和2.0处的信号也分别下降75%和50%左右.上述结果表明,从DJ35中纯化出的ΔnifEAv1是一种FeMo-co缺失而P-cluster正常的MoFe蛋白.