运用cDNA缩减杂交法克隆水稻花粉发育有关的cDNA

花粉母细胞减数分裂期是花粉发育和形成的一个重要时期.为了克隆此时期水稻花粉发育的基因,以可育系安农N及其温敏核雄性不育突变体安农S-1为材料,先抽提花粉母细胞减数分裂期幼穗的mRNA,然后采用cDNA缩减杂交法,成功地克隆了RP-1,RP-2和RP-33个cDNA.Northern杂交分析表明,这3个cDNA相对应的mRNA都只在花药中表达,而不在叶中表达,而且在安农S-1中的表达量,也明显低于在安农N中的表达量.其次,在高温(≥28℃)下生长的安农S-1的表达量也明显低于在较低温(≥25℃)下生长的安农S-1.经序列同源性分析,尚未发现与RP-1,RP-2和RP-3序列同源的基因.以上结果显示这3个是新的与水稻花粉发育有关的基因.