链霉菌M1033同源重组葡萄糖异构酶缺陷型菌株的构建

为实现有工业生产价值的葡萄糖异构酶双突变体酶GI(G138P-G247D)的稳定高效表达,在建立7号淀粉酶链霉菌M1033原生质体转化条件的基础上,构建了含600bp不完整GI(G138P-G247D)结构基因片段的插入型同源重组质粒pXW,并通过同源重组模式整合到M1033的染色体上,实现了GI基因的破坏(genedisruption),获得了同源重组葡萄糖异构酶缺陷型菌株.对同源重组片段的分析,突变引入的验证以及缺陷型菌株稳定性的检测证实了以此方法在染色体上引入突变的可行性.