利用ubi1内含子增强Btcry1Ah基因在转基因玉米中的表达

Btcry1Ah基因是从国内苏云金芽胞杆菌分离株BT8中鉴定克隆的新型杀虫蛋白基因.本研究构建了两个含有Btcry1Ah基因的植物表达载体,在其中一个植物表达载体(pUUOAH)的玉米Ubiquitin启动子与cry1Ah基因之间插入了玉米泛素蛋白基因ubiqutin1的第一个内含子(ubi1).利用基因枪法将其导入玉米(ZeamaysL.)胚性愈伤组织中,得到了可育的再生植株.PCR及Southernblot检测结果表明,cry1Ah基因已整合入玉米基因组中,并稳定遗传至下一代.对T1及T2代转基因植株进行ELISA检测,发现pUUOAH载体转基因植株Cry1Ah蛋白的平均表达量提高了20%.对T2代转基因植株进行了田间抗虫性鉴定,发现转cry1Ah基因玉米对玉米螟有很高的抗性,并且pUUOAH载体转基因植株的抗虫性好于pUOAH(无内含子)载体的转基因植株.以上结果表明,玉米ubi1内含子可以有效增强cry1Ah在转基因玉米中的表达.