甜菜夜蛾HSP90基因克隆及高温胁迫下其表达量的变化

为阐明热激蛋白90（heatshockprotein90,HSP90）在甜菜夜蛾Spodopteraexigua(Hübner)幼虫抵抗高温过程中的作用,克隆了其HSP90基因cDNA全长序列,并检测了在系列高温胁迫下不同龄期幼虫体内其相对表达量。根据已报道的热激蛋白90基因序列同源性设计简并引物,利用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）结合cDNA末端快速扩增（RACE）技术成功克隆了甜菜夜蛾HSP90基因全长cDNA（GenBank登录号FJ862050）。该cDNA序列开放阅读框长2154bp,编码717个氨基酸,预测的相对分子量和等电点分别为82.6kD和5.0。该序列具有HSP90家族的典型特征和特殊的功能结构域,并且与多种生物的HSP90基因序列有较高的同源性。为了研究HSP90抵抗高温的作用,构建荧光定量RT-PCR体系,检测了37,39,41,43和45℃胁迫下甜菜夜蛾不同龄期幼虫体内HSP90表达量的变化。结果表明,高温胁迫对甜菜夜蛾幼虫体内的HSP90表达具有明显的诱导作用。幼虫体内HSP90表达量随着温度升高呈增加的趋势。43℃和45℃胁迫下,各龄幼虫体内HSP90的表达量均显著高于常温（P<0.05）,但不同龄期之间没有显著差异。这说明HSP90在甜菜夜蛾幼虫抗高温中起到重要作用。